人類疾病的動物模型在醫(yī)學(xué)科學(xué)研究方面占有十分重要的地位。百致生物累積了豐富的動物培養(yǎng)和模型構(gòu)建經(jīng)驗(yàn)，在動物模型構(gòu)建方法上摸索出獨(dú)有經(jīng)驗(yàn)，常規(guī)動物模型構(gòu)建平均成功率98%以上，重難點(diǎn)模型（開胸/開顱術(shù)等）構(gòu)建平均成功率75%以上，形成了高效高質(zhì)量的動物模型構(gòu)建方法庫，可成功構(gòu)建上百種疾病動物模型。

部分動物模型實(shí)驗(yàn)案列：

● 動物適應(yīng)性喂養(yǎng)
動物房12h~12h晝夜交替，保持動物自由飲水、進(jìn)食，保持室溫23~25℃，一周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。
● 裸鼠皮下接種
對接種環(huán)境消毒，用注射器進(jìn)行細(xì)胞重懸，酒精棉球?qū)β闶笞⑸洳课幌竞螅?shù)生長期的細(xì)胞，制成濃度為1×107/ml的細(xì)胞懸液，按照分組進(jìn)行接種，每只裸鼠于右腋皮下緩慢接種150μl細(xì)胞懸液。拔針后迅速用針頭將細(xì)胞聚集，防止細(xì)胞液外漏。
● 成瘤觀察與測量
皮下接種后，每天觀察裸鼠健康狀態(tài)及腫瘤生長情況；待成瘤后，每2天測量腫瘤長徑與短徑并計(jì)算腫瘤體積（腫瘤體積=0.52×長徑×短徑2）。

心肌梗死(myocardial infarction,MI)是一種最危重的心血管疾病，近年來其發(fā)病率和死亡率明顯增高，是醫(yī)學(xué)中關(guān)注的熱點(diǎn)。在心肌梗死的研究中，動物模型被廣泛應(yīng)用，它的存在有利于研究心肌梗死的發(fā)生機(jī)制，并為治療方案提供理論依據(jù)。

● 大鼠心肌梗塞動物模型實(shí)驗(yàn)方案

冠狀動脈左前降支結(jié)扎

1. 實(shí)驗(yàn)開始前大鼠隨機(jī)分組；

2. 麻醉大鼠后，大鼠開胸后結(jié)扎冠狀動脈左前降支；

3. 結(jié)扎成功的大鼠可見灰白的缺血區(qū)，心電圖顯示T波抬高。后續(xù)心動超聲檢測心臟收縮功能；

梗塞面積測量

4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時取心臟，切成薄片；

5. TTC染色后甲醛固定；

6. 根據(jù)染色結(jié)果計(jì)算梗塞面積。

● 小鼠心梗模型構(gòu)建以及后續(xù)心臟功能檢測

1. 小鼠稱重，按照50mg/kg腹腔注射麻藥，待小鼠肌力下降、對外界刺激反應(yīng)遲鈍后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)；
2. 將小鼠仰臥位固定在鼠板上，脫毛膏脫掉頸部與左胸部分毛發(fā)，鵝頸燈下插氣管插管，呼吸機(jī)頻率控制在90bpm,潮氣量在3-4X100 cc/min；
3. 消毒酒精消毒左胸，在第二第三根肋骨間橫向剪開皮膚，挑起斜向的胸大肌，拉斷內(nèi)側(cè)縱向的胸小肌，暴露胸腔。切開第二第三肋骨間的肌肉，挑起，放入肋骨撐開器，避免碰到肺，暴露心臟，明顯看到胸腺、左心耳；如下圖

4. 用尖鑷子撕掉心臟包膜，左手固定心臟，暴露心耳，右手持持針器，用8-0的尼龍線在心耳下緣3-5mm LAD處進(jìn)行結(jié)扎，觀察左心室結(jié)扎處下面的顏色變化以及跳動情況；
5. 用5-0的縫合線縫合肋骨，確保肋骨完全合上，避免形成氣胸引起術(shù)后死亡；
6. 用5-0的縫合線縫合肌肉和皮膚，完全閉合后用碘酊涂抹傷口；
7.觀察小鼠狀態(tài)，拔出呼吸導(dǎo)管，用鑷子刺激小鼠手腳、尾部，刺激小鼠恢復(fù)呼吸，10-20s后無呼吸或者無規(guī)律呼吸呼吸，繼續(xù)插上呼吸機(jī)，直到能恢復(fù)自主呼吸為止；
8. 心梗后一天進(jìn)行心動超聲檢測心梗后心功能，保留射血分?jǐn)?shù)在20-40%之間的小鼠。

百致生物動物模型實(shí)驗(yàn)服務(wù)項(xiàng)目：

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